1 玫瑰组织培养的意义

　　1.1 快速繁殖

　　玫瑰有性生殖能力差，大多观赏价值高的品种不形成种子，种子繁殖不现实。而玫瑰实生苗观赏价值较差，因此生产上必须通过野蔷薇扦插再嫁接进行繁殖。利用组织培养技术可以实现玫瑰优良品种的快速繁殖，并且能保持原有的优良性状不变。玫瑰组培增殖系数为４～５，半年至一年内能获得上百万种苗。

　　1.2 获得无病毒植株

　　玫瑰在生长过程中，能感染一种或数种病毒或类病毒。长期营养繁殖，如扦插、嫁接、分株，不仅不能脱毒，反而使病毒积累，严重影响玫瑰的品质，导致玫瑰观赏价值下降，比如花径变小、色泽变淡、产花减少、斑点较多、花形不规则、易感染病虫等。通过组织培养技术，利用玫瑰茎尖脱毒后，使玫瑰的种性得到复壮，生长势增强，花径增大，色泽鲜艳，抗病能力提高，产花量上升。

　　1.3 培育新品种

　　在组织培养过程中往往会发生芽变，芽变的结果导致花色变异、花的大小变异、花期变异、叶色变异、染色体数量变异等。在组织培养过程中，一旦发生芽变，准确切取变异芽，并将其繁殖成完整植株，可产生有特殊观赏价值的新品种。

　　1.4 种质资源的保存

　　玫瑰种质资源丰富，按传统方法保存种质资源占地面积大，且资源易受人为因素和环境因素的破坏而丢失。用组培方法，用极小的空间就可长期有效地保存玫瑰的种质资源。

　　2 玫瑰组织培养的方法

　　2.1 外植体选取

　　从生长在田间或盆栽的优良品种植株上，选取生长健壮、无病虫害的当年生枝条的茎尖和幼茎。取材最好在晴天正午，并且取用植株上部的幼茎。阴雨天或靠近地面的幼茎，表面污染较为严重，难于消毒。玫瑰除用茎尖和幼茎做外植体外，也可以用叶片、叶柄、根、茎、原生质体、胚、花药、子房、花萼和花托做外植体。

　　2.2 消毒灭菌及无菌苗的建立

　　取玫瑰外植体，用5%～10%的次氯酸钠浸泡10～30min或用01%～02%的HgCl浸泡5～15min。用无菌水清洗7～10次后接种。也可先用75%的酒精浸泡20～30s再采用上述方法消毒。消毒灭菌完毕后，将幼茎切割成05～10cm长的至少带有一个节的切段，接种于培养基中。

　　2.3 愈伤组织的诱导

　　最早报道从杂交茶香月季的茎上诱导了愈伤组织，该实验证明在培养基中添加2，4-D或添加NAA和激动素KT均能很快诱导出愈伤组织。随后不同实验以不同品种为试验材料，从叶、叶柄、根、茎、原生质体、合子胚、花药、子房、花瓣、花萼、和花托成功地诱导了愈伤组织。

　　2.3.1 愈伤组织的成功诱导与品种的基因型有关

　　2.3.2 外植体类型：不同外植体愈伤产生的能力不同，叶为90%，根为70%，节间为55%，花药为19%。

　　2.3.3 激素

　　Rout等（1991）以Landora为材料，在添加BA和NAA，2，4-D的MS的培养基上，外植体在接种的7～12d后，在近轴面的叶柄和中脉处产生愈伤，愈伤组织诱导频率高达92%。在接种后15～20d，外植体茎切端处产生愈伤，诱导率为76%。生长素种类和浓度对愈伤产生能力的影响同样很大。早期实验多采用NAA结合BAP或BA等，近年来多采用2，4—D，并证明2，4—D是诱导愈伤的必要因素（Kintzios等，1999；Rout等，1996；van der Salm等，1996；Vises—suwan等，1997）。进一步研究发现2，4-D对愈伤的诱导效果依赖于月季的基因型，如2，4—D浓度从113umol/L增加到181umol/L降低了Rose hybrida栽培种“Care-freeBeauty”的愈伤诱导频率，但该浓度则对另一个品种“Grand Gala”无影响。对于“Red Sunblaze”而言，当浓度从113umol/L增加到452umol/L，则表现出愈伤的诱导率提高了，随后当2，4—D再增加，则显著地降低愈伤的诱导频率。愈伤组织在诱导愈伤组织的培养基上能得到很好继代培养（subculture、Li等，2002）。Van der Salm等（1996）证明2，4—D对诱导Rose persica与xanthina和Moneyway产生愈伤是非常必要的，进一步添加低浓度的BA有正效应，但如BA浓度过高，则产生抑制作用。与以上实验结果不同，Kintzios等（1999）则发现2，4—D对愈伤诱导有负影响作用，可能因为采用的外植体是成熟的叶片。